PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIE TESTU
Leiszmanioza trzewna lub Kala-azar to rozsiane zakażenie wywołane przez kilka podgatunków L. donovani.Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) szacuje, że choroba dotyka około 12 milionów ludzi w 88 krajach.Jest przenoszona na ludzi przez ukąszenia much piaskowych Phlebotomus, które zarażają się poprzez żerowanie na zakażonych zwierzętach.Chociaż jest to choroba występująca w biednych krajach, w Europie Południowej stała się wiodącą infekcją oportunistyczną u pacjentów z AIDS.Identyfikacja organizmu L. donovani z krwi, szpiku kostnego, wątroby, węzłów chłonnych lub śledziony zapewnia określony sposób diagnozy.Serologiczne wykrywanie anty-L.donovani IgM jest doskonałym markerem ostrej leiszmaniozy trzewnej.Do testów stosowanych w klinice należą ELISA, przeciwciała fluorescencyjne czy testy aglutynacji bezpośredniej 4-5.Ostatnio wykorzystanie białka specyficznego dla L. donovani w teście radykalnie poprawiło czułość i swoistość.
Szybki test Leishmania IgG/IgM Combo jest testem serologicznym opartym na rekombinowanym białku, który jednocześnie wykrywa przeciwciała IgG i IgM przeciwko L. Donovani.Test daje wiarygodny wynik w ciągu 15 minut bez żadnych narzędzi.
ZASADA
Szybki test Leishmania IgG/IgM jest testem immunologicznym opartym na chromatografii z przepływem bocznym.Kaseta testowa składa się z: 1) zabarwionej na bordowo podkładki z koniugatem zawierającej rekombinowany antygen L. donovani skoniugowany ze złotem koloidalnym (koniugaty Leishmania) i koniugaty króliczej IgG-złoto, 2) paska membrany nitrocelulozowej zawierającej dwa paski testowe (prążki T1 i T2) i prążek kontrolny (pasmo C).Prążek T1 jest wstępnie pokryty monoklonalną anty-ludzką IgM do wykrywania anty-L.donovani IgM, prążek T2 jest wstępnie pokryty odczynnikami do wykrywania anty-L.donovani IgG, a prążek C jest wstępnie pokryty kozią anty-króliczą IgG.
Gdy odpowiednia objętość próbki testowej zostanie dozowana do studzienki na próbkę kasety, próbka migruje przez działanie kapilarne w kasecie.Obecność IgM L. donovani w próbce wiąże się z koniugatami Leishmania.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany na błonie przez wstępnie powlekane przeciwciało anty-ludzkie IgM, tworząc bordowy prążek T1, co wskazuje na pozytywny wynik testu L. donovani IgM.Obecność IgG L. donovani w próbce wiąże się z koniugatami Leishmania.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany przez wstępnie powlekane odczynniki na membranie, tworząc bordowy prążek T2, co wskazuje na pozytywny wynik testu L. donovani IgG.
Brak prążków T (T1 i T2) sugeruje wynik ujemny.Test zawiera kontrolę wewnętrzną (prążek C), który powinien wykazywać bordowy prążek kompleksu immunologicznego koniugatu koziej anty-króliczej IgG/króliczej IgG-złoto niezależnie od zabarwienia któregokolwiek z prążków T.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbka musi zostać ponownie przetestowana przy użyciu innego urządzenia.
